HILIC 與 ANP 的區別

1. 保留機理不同

HILIC（親水作用色譜）

依靠固定相表面形成的富水吸附層，通過親水分配、氫鍵、極性作用實現保留。

保留強弱依賴水層厚度與親水強度。

ANP（Aqueous Normal Phase，水相容正相）

屬于改性正相色譜，保留以極性吸附 / 氫鍵作用為主，

不依賴厚水層，更接近正相保留行為，但可耐受含水流動相。

2. 固定相差異

HILIC

通常為高極性固定相：二醇基、酰胺、氨基、兩性離子等，

表面硅羥基或極性基團多，易吸附水形成厚水層。

ANP

多采用低極性、低羥基、低表面能的基質（如菲羅門 C 型硅膠），

表面水吸附量極少，極性弱，更接近正相固定相。

3. 流動相行為不同

HILIC

流動相：高比例有機相 + 水相（一般 5%–40% 水）。

水越多，保留越弱。

平衡慢，需充分重建水層。

ANP

流動相：高比例有機相，可含少量水（0%–10%）。

少量水不顯著減弱保留，只改善峰形與溶解度。

平衡快，無需重建厚水層。

4. 穩定性與耐受性

HILIC

對水含量、pH、緩沖鹽敏感，

方法重現性依賴嚴格平衡，條件變化易導致保留漂移。

ANP

流動相寬容度更高，少量水不破壞固定相，

平衡快、基線穩、方法重現性更好，

尤其適合正相轉水相體系的手性分析。

5. 適用場景

HILIC

強極性、水溶性化合物（如糖苷、多肽、極性代謝物）。

缺點：平衡慢、易漂移。

ANP

適合既要水相容，又想要正相分離效果的樣品，

特別適合手性化合物、極性藥物、天然產物，

可在正相基礎上直接加入少量水，改善溶解性與峰形。